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灭菌温度应是一个温度范围，而不是一个固定值

    通常，高压蒸汽灭菌温度是一个固定值，如，试管斜面培养基和摇瓶液体培养基的灭菌要求为：121℃，20min，但在121℃只是灭菌温度的下限，实际的灭菌温度在121℃～124℃（或123℃）之间波动。如果是自动控温型灭菌锅，设定好灭菌温度下限为121℃后，当温度升到124℃（或123℃）时，自动断电停止加热，当温度降到121℃时，自动开始加热；如果是手动控温型灭菌锅，当温度升到124℃时，手动切断电源停止加热，当温度降到121℃时，手动接通电源开始加热。

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消毒物品的初步处理

    凡接触过病原微生物的医疗器械等物品均应先用化学消毒r剂进行消毒，然后按照常规清洗，特别是传染病房使用后的各类物品，要严格把关，先严密消毒后，再清洗消毒；有轴节、齿槽或缝隙的器械和其他物品，应尽可能张开或拆卸，进行彻底清洗；其他微生物、细胞等培养用物品应按照相关方法清洗干净；洗涤后的物品应烤干，按各需要分包，防止交叉污染。

装入灭菌物品前的准备

    将待测灭菌物放入灭菌器之前，一定先检查灭菌仓内的水位，防止水位过高或干烧；高压灭菌器腔盖要到旋转到一定高度，过松容易造成，灭菌过程中的蒸汽泄漏，过紧容易造成密封圈的摩擦变形，最r好选择有自动压力连锁装置的灭菌器。

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    细r菌过滤器与滤膜（孔径0.45微米，可先用0.65微米的滤膜进行出滤，再用0.45微米的滤膜过滤，这样可以减少堵塞，使过滤更为顺畅。）使用之前要先进行高压灭菌。

    过滤后的溶液要立即加入培养基中，若为液体培养基，可在培养基冷却至30℃ 时加入；若为固体培养基，必须在培养基凝固之前（50-60℃）加入，振荡使溶液与其他成分混合均匀。

    培养基灭菌后最常见的污染原因：主要原因灭菌温度或灭菌时间不够，冷空气未排除彻底，使得灭菌不彻底导致污染产生。

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